En la clase 1 nos presentaron el laboratorio y Claudia nos explicó, a grandes rasgos, de qué el proyecto se trataba,
Básicamente el proyecto busca acelerar la respuesta inmunológica a las células tumorales, así que vamos a buscar transfectar las células con ciertas moléculas que permiten tal respuesta.
En la segunda clase preparamos y pusimos a punto los reactivos que ibamos a usar en los sucesivos días, la mayoría de los reactivos eran buffers que usamos para purificar los plásmidos, en primer lugar, de una proteína llamada GFP y en segundo lugar, la molécula CD 40 Ligando, que es uno de los receptores que facilitan la respuesta inmune.
En la tercera clase empezamos a meter más mano, usamos el protocolo Qiagen para la purificación de plásmidos para el pQBI25, que es AMPr y G418r, para producir la molécula fluorescente GFP, luego los almacenamos para otra clase en la que le mediríamos la concentración del plásmido; esta primera práctica fue más que nada para que aprendiéramos a cómo hacer el proceso, la segunda la sacamos más fácil,
En la cuarta clase hicimos lo mismo, pero con el plásmido pCD40L, que también es AMPr y G418r, ya como para darle un toque más serio a lo que estabamos haciendo, ya que, en parte, es en esa molécula donde se basa el proyecto; como cuestión adicional, Claudia nos mostró cómo quedaron las bacterias una vez transfectadas con pQBI25 (la de la GFP), viéndolas microscópicamente pudimos ver cómo brillaban, nuestro trabajo no fue en vano;
En la quinta clase cuantificamos la cantidad de plásmidos y la pureza de ellos, tanto por métodos refractométricos como por una corrida electroforética y todo nos viene dando muy bien.
